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                    Thermo Pierce™ 磁性 ChIP 試劑盒 分子生物試劑

                    • 更新時(shí)間:  2023-07-27
                    • 產(chǎn)品型號(hào):  26157
                    • 簡(jiǎn)單描述
                    • Thermo Pierce™ 磁性 ChIP 試劑盒
                      Thermo Scientific Pierce 磁性 ChIP 試劑盒提供了一種通過(guò)免疫沉淀(染色質(zhì) IP)高效分離染色質(zhì)結(jié)合 DNA 的便利方法,用于隨后通過(guò) PCR 進(jìn)行定量分析。
                    詳細(xì)介紹

                    Thermo Pierce™ 磁性 ChIP 試劑盒


                    Thermo Scientific Pierce 磁性 ChIP 試劑盒提供了一種通過(guò)免疫沉淀(染色質(zhì) IP)高效分離染色質(zhì)結(jié)合 DNA 的便利方法,用于隨后通過(guò) PCR 進(jìn)行定量分析。

                    磁性 ChIP 試劑盒的特點(diǎn):

                    快速— 可在約 8 小時(shí)內(nèi)獲得適于進(jìn)行定量 PCR 的純化 DNA
                    高效且可重現(xiàn)—微球菌核酸酶酶切過(guò)程和細(xì)胞核裂解過(guò)程均經(jīng)高度優(yōu)化
                    靈敏—只需 10,000 個(gè)細(xì)胞 (1 x 10^4) 即可獲得結(jié)果
                    低背景—Pierce 蛋白 A/G 磁珠已在不含 DNA 的試劑中進(jìn)行封閉,可極大限度地降低背景
                    全面—包括優(yōu)化的陽(yáng)性對(duì)照試劑:RNA 聚合酶 II 抗體和 GAPDH 啟動(dòng)子 PCR 引物

                    Pierce 磁性染色質(zhì)免疫沉淀分析 (ChIP) 試劑盒含有足夠的試劑,可使用優(yōu)化的方案采用適當(dāng)對(duì)照品進(jìn)行 30 次 ChIP 檢測(cè)。試劑盒中包含的試劑可用于裂解細(xì)胞、捕獲蛋白-DNA 復(fù)合物,逆轉(zhuǎn)交聯(lián)以及分離 DNA。封閉 Pierce 蛋白 A/G 磁珠具有ji高的結(jié)合容量和較低的非特異性背景,可與很多種抗體一起使用。這些微珠可與磁力架或自動(dòng)化平臺(tái)(例如,Thermo Scientific KingFisher 儀器)一起用于手動(dòng)工作流程。還提供經(jīng)驗(yàn)證適用于 ChIP 且具備質(zhì)量保證的抗體,與 Pierce 磁性 ChIP 試劑盒配合使用。

                    包括:
                    試劑盒含有用于染色質(zhì)制備、IP 以及 DNA 純化的試劑,同時(shí)也包含陽(yáng)性對(duì)照品(抗體和引物)

                    需要:
                    體內(nèi)交聯(lián)劑(如甲醛)、微量吸頭超聲波儀(如 Misonix™ 超聲波儀 3000)、符合 ChIP 要求的首xuan抗體、目標(biāo) DNA 序列的 PCR 引物、PCR 預(yù)混液(如果需要 qPCR,則含有一種染料,如 SYBR™ Green)和 qPCR 儀器

                    應(yīng)用:
                    • 通過(guò) PCR 或 ChIP-Seq 確定基因組 DNA 上特異性蛋白-DNA 相互作用的位點(diǎn)
                    • 監(jiān)測(cè)組蛋白修飾或化學(xué)制劑對(duì) DNA 結(jié)合的影響

                    要想成功進(jìn)行 ChIP 檢測(cè),需要在檢測(cè)靶標(biāo)基因組 DNA 之前執(zhí)行多個(gè)關(guān)鍵步驟(交聯(lián)、染色質(zhì)制備、免疫沉淀)。單獨(dú)來(lái)講,ChIP 實(shí)驗(yàn)方案中的每一步在優(yōu)化時(shí)都很費(fèi)時(shí)間。Thermo Scientific Pierce 磁性 ChIP 試劑盒簡(jiǎn)化了 ChIP 流程,可獲得準(zhǔn)確且可重現(xiàn)的結(jié)果。

                    蛋白-DNA 復(fù)合物首先在體內(nèi)與甲醛交聯(lián)。試劑盒含有的試劑可以裂解細(xì)胞,并可提取和溶解交聯(lián)復(fù)合物。然后,將復(fù)合物和特異性抗體放在一起進(jìn)行孵育,最后用 Pierce 蛋白 A/G 磁珠進(jìn)行分離。在逆轉(zhuǎn)交聯(lián)和酶切蛋白后,純化所得 DNA 片段,然后準(zhǔn)備進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)或定量 PCR。



                    Thermo Pierce™ 磁性 ChIP 試劑盒


                    規(guī)格

                    容量(公制)
                    4×10^6 個(gè)細(xì)胞/反應(yīng)
                    描述
                    Pierce 磁性 ChIP 試劑盒
                    形式
                    試劑盒
                    產(chǎn)品線
                    Pierce™
                    數(shù)量
                    1 個(gè)試劑盒
                    類型
                    磁珠 ChIP 試劑盒
                    足夠用于
                    30 次反應(yīng)
                    產(chǎn)品規(guī)格
                    試劑盒

                    內(nèi)容與儲(chǔ)存

                    • 甘an酸溶液 (10X),15 mL;在室溫下儲(chǔ)存
                    • PBS (20X),15 mL;在 4°C 下儲(chǔ)存
                    • Halt™ 蛋白酶和磷酸酶抑制劑混合物,無(wú) EDTA (100X),1 mL;在 4°C 下儲(chǔ)存
                    • 膜提取緩沖液,10 mL;在 4°C 下儲(chǔ)存
                    • MNase 酶切緩沖液,10 mL;在 4°C 下儲(chǔ)存
                    • DTT (7.7 mg),凍干,2 個(gè)樣品瓶;在室溫或 4°C 下儲(chǔ)存
                    • MNase 終止液,1 mL;在 4°C 下儲(chǔ)存
                    • ChIP 級(jí)蛋白 A/G 磁珠,0.7 mL;在 4°C 下儲(chǔ)存
                    • IP 稀釋/洗滌緩沖液 (5X),40 mL,在 4°C 下儲(chǔ)存
                    • 氯化鈉 (5M),6 mL;在 4°C 下儲(chǔ)存
                    • IP 洗脫緩沖液 (2X),4.5 mL;在 4°C 下儲(chǔ)存
                    • 微量離心管,1.5 mL,75 個(gè)管;在室溫或 4°C 下儲(chǔ)存
                    • DNA 純化柱和試劑,40 次純化;在室溫或 4°C 下儲(chǔ)存
                    • DNA 純化柱,40 個(gè)柱
                    • DNA 柱結(jié)合溶液,30 mL
                    • DNA 柱洗滌液,6 mL
                    • pH 指示劑,0.8 mL
                    • DNA 柱洗脫液,5 mL
                    • 微球菌核酸酶(ChIP 級(jí))(10 U/µL),50 µL;在-20°C 下儲(chǔ)存
                    • 抗 RNA 聚合酶 II 抗體,25 µL;在-20°C 下儲(chǔ)存
                    • 正常兔 IgG (1 mg/mL),10 µL;在-20°C 下儲(chǔ)存
                    • 蛋白酶 K (20 mg/mL),0.25 mL;在-20°C 下儲(chǔ)存
                    • ChIP 陽(yáng)性對(duì)照引物(GAPDH 啟動(dòng)子,人特異性),100 µL;在 -20°C 下儲(chǔ)存




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